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产品编号 93113
商品说明
本试剂盒用于定性检测人肺泡灌洗液、痰液、气管分泌物等样本中肺孢子菌、曲霉菌核酸。 检验原理
本试剂盒采用荧光定量PCR反应,结合Taqman技术。分别以肺孢子菌、曲霉菌基因设计两组特异性引物和荧光标记的探针。PCR扩增过程中,探针分别与模板结合时,当扩增延伸到探针结合的位置时,Taq酶利用5'外切酶活性,将探针5'端连接的荧光分子从探针上切割下来,从而远离淬灭基团,产生荧光信号。检测到的荧光分子数与PCR产物的数量成正比,进而荧光定量PCR,根据检测到的荧光信号自动绘制出实时扩增曲线,并计算出样本Ct值(每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数)。通过检测荧光信号的强度和扩增曲线的形状来判断是否有特异的PCR产物形成,从而判断所测样本中是否含有目的DNA片段。其中FAM通道检测肺孢子菌,HEX/VIC通道检测曲霉菌,ROX通道检测内参基因。本品使用内源性内参,通过检测样本中人类基因组管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的基因,可以监控和避免由于样本中的PCR抑制物或操作不当造成的假阴性结果。 |