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产品描述
无缝克隆技术是一种简单、快速并且高效的DNA克隆技术,可快速将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。试剂盒可以高效兼容1-5个片段同源重组,使用高度集成的2 ×Mix,50℃反应5 - 30 min即可进行连接,对同源臂长度、同源臂GC含量、未纯化体系等兼容性更广,提高了复杂体系的克隆成功率。 产品组成
产品特点 Ø 快速:15分钟即可完成反应; Ø 高效:5 kb以下片段插入阳性率可达90%以上,5 kb以上阳性率可达50%以上; Ø 简便:无需酶切、连接反应; Ø 本产品可将线性化载体与两端具有15-25bp重叠区域的PCR片段定向重组,实现1-5个片段的高效无缝克隆; Ø 可用于单/多点基因突变、多顺反子表达载体构建。 克隆原理
应用案例 1.更多的菌落以及高阳性率 测试4个体系,分别是人干扰素α基因(498 bp)/pET28a(5369 bp)、人ACE2基因(2421 bp)/pET32a(5900 bp)、人P53基因(1185 bp)/pET43a(7275 bp)和非洲猪瘟F1055L基因(3150 bp)/pET43a(7275 bp),分别将本产品与同类型产品进行平行测试(竞品1:Tr***,竞品2:Ti***,竞品3:Va***,,竞品4:Be***),统计转化后菌落数,随机挑取20个单菌落PCR验证阳性率。 图1. 亿目思无缝克隆试剂与同类型产品菌落数比对 图2. 亿目思无缝克隆试剂与同类型产品阳性率比对
2. 兼容性广 测试同源臂GC含量为75.5%和6.3%的体系、PCR扩增片段未纯化体系,阳性率皆在90%以上。 图3. 亿目思无缝克隆试剂兼容性测试 推荐产品
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