细胞计数试验

1、目的及适用范围
该SOP用来规范细胞计数的实验操作。
2、主要仪器
计数板（0.1mm×1/400mm2）、盖玻片、低倍倒置显微镜
3、操作步骤
3.1 将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上。
3.2 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖玻片边缘，使悬液充满盖玻片和计数板之间，静置3min，注意盖玻片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3.3 数出计数室的四角的四个中方格的细胞总数，再除4，最后乘以2.5×104，即为每mL细胞悬浮液之细胞数。若细胞位于线上，只计上线与右线之细胞(或计下线与左线之细胞)。
4、问题向导
4.1细胞数/mL=4中格细胞总数/4×2.5×104
4.2计数板计数时，最适浓度为5～10×105细胞/mL，此范围外计数误差偏大。高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按当个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。

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