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详细说明

HS Green qPCR SuperMix with UDG without ROX

价格
¥150.00
规格
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产品编号 11125
产品描述


Component

11125S

11125M

11125L

2×HS   Green qPCR SuperMix with UDG

1×1ml

5×1ml

25×1ml

Nuclease-free   Water

1ml

5 ml

25 ml

存储和稳定性   –20避光保存2年。

 

产品简介

本品内含双封闭热启动Taq DNA polymerase、双阳离子缓冲液、dATPdUTPdCTPdGTPUDG (Uracil-DNA Glycosylase)SYBR Green I荧光染料、dNTPMg2+和稳定剂。本产品为2×浓度,只需加入模板、引物和水,使其工作浓度为1×即可反应

 

推荐qPCR反应体系配制(以20 μl反应体系为例)

Components

Volume

Final   Concentration

Primer mix (10 μM each)

0.4 μl

0.2μM   each

Template   DNA*

Variable

as   required

2× HS Green qPCR SuperMix with UDG

10 μl

1 ×

Autoclaved distilled water

up to 20   μl

Not applicable

* DNA模板:基因组建议10 pg-1μg,质粒建议 10-107 copies

 

PCR 反应条件

Temperature

三步法

两步法

Cycles

50°C

2 min

2 min

1

94°C

5 min

5 min

1

94°C

5 sec

5 sec

40-45

55°C

15 sec*

30 sec*

72°C

10 sec*

-

 

对于ABI仪器,荧光信号采集步骤(三步法中可以是退火或是延伸步骤)的时间如下

Ø  使用ABI Prism7700/7900时,采集时间设定为30秒;

Ø  使用ABIPrism7000/7300时,采集时间设定为31秒;

Ø  使用ABIPrism7500时,采集时间设定为34秒;

Ø  使用ABI ViiA 7时,采集时间设定为至少19秒。

高扩增效率选择三步法。高特异性选择两步法。


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