Component | 5 KU (50 U/μl) | 50 KU (50 U/μl) | 50 KU (500 U/μl) | 500 KU (500 U/μl) | 500 KU (5000 U/μl) | 5000 KU (5000 U/μl) |
T7 RNA Polymerase | 100 μl | 1 ml | 100 μl | 1 ml | 100 μl | 1 ml |
10X Transcription Buffer | 1 ml | 2 ml | 2 ml | 20 ml | 20 ml | 200 ml |
产品用途
合成单链RNA，包括mRNA，siRNA，gRNA等各类RNA的前体。
合成标记或未标记的高特异性RNA探针。
利用帽子类似物合成加帽的mRNA。
质量控制
SDS-PAGE检测纯度大于90%，经检测无外源核酸酶活性。
体外转录反应条件
1. 将所有实验材料从-20℃取出解冻，振荡混匀，短暂离心收集液体于管底；
2. 配制反应体系：
Component | 20 µl RXN | Final Concentration |
10×Transcription Buffer | 2 µl | 1× |
T7 RNA Polymerase (50 U/µl) | 2 µl | 5 U/µl |
Pyrophosphatase, Inorganic | 1 µl | 5 mU/µl |
RNase Inhibitor (40 U/µl) | 1 µl | 2 U/µl |
ATP/CTP/GTP/UTP (100mM) | Each 1-2 µl | Each 5-10 mM |
Template DNA | 0.5-2 µg | 25-100 ng/µl |
Nuclease-Free Water | up to 20 µl |
|
3. 37℃温浴1-2 h；
4. 加入1 μl DNase I (1 U/μl)，混匀，37℃反应15 min，去除Template DNA；
5. 合成的RNA经纯化、质控合格后可用于后续实验或工艺。
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Cat. No. | Products |
70334 | T7 High Yield RNA Transcription Kit |
30651 | CRISPR Guide RNA Transcription Kit |
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20221 | RNase Inhibitor（Human Placenta） |
70451 | Pyrophosphatase, Inorganic |
70381 | DNase I |
70332 | T7 RNA Polymerase (500 U/µl，高浓度) |
70333 | T7 RNA Polymerase (5000 U/µl，高浓度) |
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