5min同步完成基因组去除和逆转录，让你快人一步

       进行基因表达分析时，需在逆转录前去除RNA模板中残留的基因组DNA（gDNA）。通常的做法是加入DNaseⅠ核酸酶并在特定温度下反应一段时间，待gDNA消化干净后还需灭活DNaseⅠ，然后再进行下一步的逆转录反应，导致步骤繁琐且易造成RNA的降解，从而影响实验结果。亿目思推出逆转录全预混液，可实现5min同步完成基因组去除和逆转录反应，最大限度的避免了RNA不稳定易降解所造成的困扰。

1. 产品简介

在检测基因表达水平时，RNA样品中残留的DNA会与目的RNA共同扩增，从而产生假阳性现象，例如Ct值偏小、Ct值波动以及熔解曲线双峰。因此必须去除gDNA，以保证实验数据的准确。

▲ Ct值偏小/Ct值波动

亿目思选用gDNA Removal可特异清除RNA样本中残留的gDNA，而不会对体系中的引物（Random Primer /oligo-dT）造成影响，因此可直接加入逆转录反应体系，从而实现逆转录反应的同时消化gDNA。另外该产品选用经分子改造的高效逆转录酶，将反应时间大幅缩短，仅需5min即可获得普通逆转录酶90min生成的cDNA产量。

2. 产品性能

1）优异的逆转录效率

分别以甲流病毒、小鼠肝脏、拟南芥叶片10 ng / 1 μg RNA 为模板，使用亿目思All-in-one RT SuperMix ( gDNA Removal) (Cat. 20133) 与市面常见国内外品牌All-in-one 产品（Tr*、Va*、Ti*、Ta*）同时进行逆转录。将得到的 cDNA 进行qPCR定量分析。从图中可以看出，在不同品种模板上，亿目思All-in-one RT产品的qPCR CT 值最低，证明其具备优异的逆转录效率。

2）良好的cDNA稳定性

使用亿目思All-in-one RT SuperMix ( gDNA Removal) (Cat. 20133)逆转50 ng Vero 细胞RNA，将得到的cDNA 于37℃放置7 天、4℃放置4 周、冻融30 次进行测试，同时以-20℃存放cDNA 作为对照。将不同处理后的 cDNA 进行qPCR 定量分析。

从图中可以看出， cDNA 在各种条件下定量得到的CT变化值（△CT）均在0.5 范围内（△CT 于±0.5 以内，认为两者差异可忽略不计），说明亿目思All-in-one RT产品逆转录得到的cDNA 可于37℃存放7 天、4℃存放4 周、反复冻融30 次，cDNA 依然具有良好的稳定性。

3）较强的抑制剂耐受度

在RNA的提取过程中常常因操作或样本的特殊性导致RNA中混有有机试剂或杂质，这些物质的残留会严重影响逆转录效率。乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸是 RNA 提取过程中较为常见的杂质，测试其对逆转录效率的影响。

分别对上述 5 种杂质设置 3 个不同浓度梯度，添加至 亿目思All-in-one RT SuperMix ( gDNA Removal) (Cat. 20133)逆转录体系中，将得到的 cDNA 进行 qPCR 检测。以不同浓度杂质为横坐标，△CT  (△CT = 含杂质逆转录 cDNA 扩增 CT 值 – 未含杂质逆转录 cDNA 扩增 CT 值 ) 为纵坐标绘图。从图中可以看出，△CT 均小于 0.15，说明亿目思All-in-one RT产品对上述 5 种常见杂质具有较强的耐受度。

3. 产品优势：

Ø  更强的延伸能力：逆转后可扩增出长达18 kb的长片段cDNA。

Ø  更高的逆转录效率：与市售其他逆转录试剂相比，亿目思产品可获得更多的cDNA产量和更小的CT值。

Ø  更快的反应速度：5 min完成逆转录反应。

4. 产品规格

产品链接：https://www.ymstec.com/pro_27738630_7896765_7907367_1.html

5. 产品选择策略