1、目的及适用范围
该SOP用来规范MTT法的操作。
2、主要仪器及试剂
酶标仪、MTT（5mg/mL用PBS(ph=7.4)配制）、DMSO
3、操作步骤
3.1 接种细胞：用含10％胎牛血清的DMEM培养基配成单细胞悬液，以每孔1000～10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200μL。
3.2 培养细胞：同一般培养条件，培养3～5d（可根据试验目的和要求决定培养时间）。
3.3 呈色：培养3～5d后，每孔加5mg/mL MTT溶液20μL。继续孵育4h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150μLDMSO，振荡10min，使结晶物充分融解。
3.4 比色：选择490nm波长，在酶标仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
4、问题向导
4.1 选择适当得细胞接种浓度。
4.2 避免血清干扰：一般选小于10％的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。
4.3 设空白对照：与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致，最后比色以空白调零。
4.4 MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间，超出这个范围就不是直线关系。
